Primer和Primer引物
1. 引物(Primer)的作用
在分子生物学实验中常用的短片段单链DNA或RNA,通常由15-30个核苷酸组成。引物在实验中起到特异性结合目标DNA或RNA模板的作用,并为DNA或RNA聚合酶提供起始位点,从而引导聚合酶进行核酸的合成。
2. 引物的设计要点
引物长度常用的是18-27 bp,但不应大于38,因为过长会导致其延伸温度大于74℃,不适于Taq DNA聚合酶进行反应。引物的GC含量在40%~60%间,Tm值最好近72℃。
3. PrimerPremier6安装和破解步骤
1. 下载安装包:包括安装软件包、破解软件包和一个java安装软件。
2. 安装软件:按照指示安装PrimerPremier6软件。
3. 使用破解软件:破解软件解除软件的限制,让软件能够充分使用。
4. 引物设计工具PrimerBank使用
通过PrimerBank设计引物可以用基因信息搜索,也可以通过mRNA和蛋白搜索。只需利用NCBI找到对应的ID输入即可。在PrimerBank网站上选择数据库类型、物种,输入Gene ID,最后点击提交即可。
5. 引物编辑工具PrimerPremier5.0
引物编辑窗口可以用来设计用于定点突变的引物或分析已有引物序列。在windows系统或Power Mac的Command-X Command-C及Command-V系统中可以使用快捷键来实施剪切、拷贝等操作。